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问题分析:重症肌无力(myasthenia gravis,MG)是一种神经肌肉系统疾病,由于病人的自身抗体与神经肌肉接头处的乙酰胆碱受体(AchR)结合,对其可以起到封闭和破坏作用,使得神经冲动不能传导至肌肉而表现为肢体的软弱无力。现已知哺乳动物骨骼肌纯化的AchR由5个亚单位(α2、β、α2、γ、δ)通过链间的二硫键连接而成,富含酸性氨基酸和糖性侧链。由于α-银环蛇毒素(α-bunga-rotoxin,α-BGT)可高度选择性地与AchR的α-亚单位结合,因此广泛应用于AchR-Ab的检测。抗AchR-Ab是一种多克隆抗体,多数属于抗α-银环蛇毒素结合部的抗体,主要为IgG型(以IgG1、IgG2亚类为主,IgG3亚类次之),也可检测到IgM型,且不同类型的MG病人血清抗AchR抗体具有不同性质。
2014-07-29
问题分析:(1)免疫沉淀法:用125Ⅰ-标记的α-BGT与AchR和待测血清中的抗AchR抗体形成免疫复合物,在加入抗人IgG后使免疫复合物沉淀,通过沉淀中125Ⅰ的放射性来判断抗AchR抗体的存在和水平高低。(2)ConA-Sepharose法:检测待测血清中抗AchR抗体是否可阻断125Ⅰ标记的α-BGT与AchR的结合或阻断125Ⅰ标记的α-BGT-AchR复合物与ConA-Sepharose的结合,当有抗AchR抗体存在时,ConA-Sepharose上吸附的放射性减少。(3)酶联免疫吸附试验:先以α-BGT预包被反应板,与AchR特异结合,封闭后的后续反应与一般ELISA间接法相同
2014-07-29
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